低速離心機是實驗室中分離液體混合物(如細胞沉淀、組織勻漿)的常用設備,正確操作需結合轉速、時間與轉子類型三要素,以確保分離效果并避免設備損壞。以下是具體指南:
一、轉速選擇:平衡分離需求與樣品安全
根據樣品類型設定轉速
細胞沉淀:通常選擇800-1500×g(相對離心力),如分離哺乳動物細胞(如HeLa細胞)時,1000×g離心5分鐘即可使細胞沉降至管底。
組織碎片:需更高轉速(2000-3000×g),例如分離肝臟勻漿中的細胞核時,2500×g離心10分鐘可有效沉淀大顆粒碎片。
輕質顆粒(如外泌體):需低速(500-800×g)結合長時間離心,避免顆粒破裂。
避免超速運行
低速離心機轉子設計有最大轉速限制(如4000rpm對應約2000×g),超速可能導致轉子變形或破裂。使用前需核對轉子銘牌標注的最大轉速(RCF),而非僅參考電機轉速(rpm)。
二、時間設定:匹配轉速與分離目標
短時間離心(1-5分鐘):適用于快速沉淀大顆粒(如血細胞、酵母細胞),但可能殘留細小碎片。
長時間離心(10-30分鐘):用于分離微小顆粒(如病毒顆粒、細胞器)或需高純度沉淀的場景。
梯度離心優化:若需分離不同密度組分(如密度梯度離心法分離細胞器),需分階段設定轉速與時間(如先低速離心去除大碎片,再高速離心分離目標組分)。
三、轉子選擇:適配樣品量與容器類型
固定角轉子:適用于高容量樣品(如50mL離心管),但沉淀顆粒集中于管底側壁,需調整取樣位置。
水平轉子(擺桶轉子):沉淀顆粒均勻分布于管底,適合需要平鋪沉淀的場景(如DNA提取后的乙醇沉淀)。
微量離心轉子:適配0.2mL或1.5mL離心管,用于小體積樣品(如PCR反應液)的快速分離。
四、操作注意事項
對稱平衡:離心管需按轉子要求對稱放置,質量誤差不超過0.1g,避免振動損壞設備。
蓋緊管蓋:防止離心過程中液體泄漏腐蝕轉子或電機。
預冷處理:若需低溫離心(如4℃分離蛋白質),提前將轉子與離心管置于冰箱預冷。
降速停止:離心結束后等待轉子自然停止,勿強行制動,防止樣品重新懸浮。
總結:低速離心機的科學使用需結合樣品特性(顆粒大小、密度)、分離目標(純度、回收率)及轉子類型綜合決策。建議通過預實驗優化轉速-時間組合,并嚴格遵循設備說明書中的轉速與轉子匹配要求,以確保實驗結果可靠性與設備安全性。